Нефелометрія в тому, що вона складається і застосування

The нефелометрія полягає в вимірюванні випромінювання, викликаного частинками (в розчині або в суспензії), таким чином вимірюючи потужність розсіяного випромінювання під кутом, відмінним від напрямку падаючого випромінювання.

Коли частинка в суспензії досягається пучком світла, є частина світла, яка відбивається, інша частина поглинається, інша частина відхиляється, а інша передається. Ось чому, коли світло вражає прозору середу, в якій знаходиться суспензія твердих частинок, суспензія спостерігається хмарно.

Індекс

• 1 Що таке нефелометрія??
  • 1.1 Дисперсія випромінювання частинками в розчині
  • 1.2 Нефелометр
  • 1.3 Відхилення
  • 1.4 Метрологічні характеристики
• 2 Програми
  • 2.1 Виявлення імунних комплексів
  • 2.2 Інші програми
• 3 Посилання

Що таке нефелометрія??

Дисперсія випромінювання частинками в розчині

У момент, коли промінь світла потрапляє на частинки речовини в суспензії, напрямок поширення променя змінює його напрямок. Цей ефект залежить від наступних аспектів:

1.Розмір частинки (розмір і форма).

2. Характеристики суспензії (концентрації).

3. Довжина хвилі і інтенсивність світла.

4. Відстань падаючого світла.

5. Кут виявлення.

6. Показник заломлення середовища.

Нефелометр

Нефелометр є приладом, що використовується для вимірювання частинок, зважених у рідкому зразку або в газі. Таким чином, фотоелемент, розташований під кутом 90 ° відносно джерела світла, виявляє випромінювання частинками, присутніми в суспензії.

Крім того, світло, що відбивається частинками до фотоелемента, залежить від щільності частинок. На діаграмі 1 представлені основні компоненти, що складають нефелометр:

A. Джерело випромінювання

У нефелометрії життєво важливо мати джерело випромінювання з високим світловим виходом. Існують різні типи, починаючи від ксенонових ламп і ламп ртуті, галогенних ламп вольфраму, лазерного випромінювання.

B. Монохроматична система

Ця система розташована між джерелом випромінювання і кюветою, так що таким чином уникнути падіння на кювету випромінювання з різними довжинами хвиль у порівнянні з потрібним випромінюванням..

В іншому випадку флуоресцентні реакції або нагрівальні ефекти в розчині можуть викликати відхилення від вимірювання.

C. Читання кювети

Це звичайно призматичний або циліндричний контейнер і може мати різні розміри. У цьому є рішення в дослідженні.

D. Детектор

Детектор розташований на певній відстані (зазвичай дуже близько до бака) і відповідає за виявлення випромінювання, розсіяного частинками суспензії..

E. Система читання

Як правило, це електронна машина, яка отримує, перетворює і обробляє дані, які в даному випадку є вимірами, отриманими в результаті проведеного дослідження.

Відхилення

Кожне вимірювання підлягає відсотку помилки, яке в основному дається:

Забруднені відра: в кюветах будь-який агент, зовнішній по відношенню до досліджуваного розчину, який знаходиться всередині або за межами кювети, зменшує випромінювання світла на шляху до детектора (дефектні кювети, приклеєна пил до стінок кювети).

Втручання: наявність деякого мікробного забруднення або каламутності диспергує променисту енергію, збільшуючи інтенсивність дисперсії.

Флуоресцентні сполукиЦе сполуки, які при збудженні падаючого випромінювання викликають помилкові і високі показники щільності дисперсії.

Консервація реагентів: неадекватна температура системи може спричинити несприятливі умови для дослідження і викликати присутність каламутних реагентів або преципітатів.

Коливання електричної енергії: Щоб уникнути попадання випромінювання як джерела помилок, стабілізатори напруги рекомендуються для рівномірного випромінювання.

Метрологічні характеристики

Оскільки потужність випромінювання виявленого випромінювання прямо пропорційна масовій концентрації частинок, нефелометричні дослідження мають у теорії більш високу метрологічну чутливість, ніж інші подібні методи (наприклад, турбідиметрія)..

Крім того, ця методика вимагає розбавлених розчинів. Це дозволяє мінімізувати як явища поглинання, так і відображення.

Програми

Нефелометричні дослідження займають дуже важливе місце в клінічних лабораторіях. Застосування варіюється від визначення імуноглобулінів і білків гострої фази, комплементу і коагуляції.

Виявлення імунних комплексів

Коли біологічний зразок містить цікавий антиген, він змішується (в буферному розчині) з антитілом для утворення імунного комплексу.

Нефелометрія вимірює кількість світла, розсіяного за допомогою реакції антиген-антитіло (Ag-Ac), і таким чином виявляються імунні комплекси..

Це дослідження може бути здійснено двома методами:

Нефелометрія кінцевої точки:

Ця методика може бути використана для аналізу кінцевої точки, в якій антитіло досліджуваного біологічного зразка інкубується протягом 24 годин.

Комплекс Ag-Ac вимірюється за допомогою нефелометра, а кількість розсіяного світла порівнюється з аналогічними вимірюваннями, проведеними до формування комплексу.

Кінетична нефелометрія

У цьому методі швидкість формування комплексу контролюється безперервно. Швидкість реакції залежить від концентрації антигену в зразку. Тут вимірювання приймаються як функція часу, тому перше вимірювання приймається в момент "нуля" (t = 0).

Кінетична нефелометрія є найбільш використовуваною технікою, оскільки дослідження може бути проведено за 1 годину, порівняно з тривалим періодом часу кінцевого методу. Коефіцієнт дисперсії вимірюють відразу після додавання реагенту.

Тому, поки реагент є постійним, кількість присутнього антигену вважається прямо пропорційним швидкості зміни.

Інші програми

Нефелометрія, як правило, використовується в аналізі якості хімічної води, для визначення ясності і для контролю процесів її обробки.

Він також використовується для вимірювання забруднення повітря, в якому концентрація частинок визначається з дисперсії, яку вони виробляють в падаючому світлі..

Список літератури

1. Britannica, E. (s.f.). Нефелометрія і турбідиметрія. Відновлено з britannica.com
2. Al-Saleh, M. (s.f.). Турбідиметрія та нефелометрія. Отримано з pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Відновлено з technochemical.com
4. Morais, I. V. (2006). Турбідиметричний і нефелометричний аналіз потоків. Отримано з repositorio.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Принципи нефелометрії та турбідиметрії. Отримано з notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Основи імунології та серології. Олбані, Нью-Йорк: Thompson Learning. Отримано з books.google.co.ve
7. Вікіпедія. (s.f.). Нефелометрія (медицина). Отримано з en.wikipedia.org