Поділитися:
Біохімічні тести типів, для чого вони є і важливі
The біохімічні тести в мікробіології - це комплекс хімічних випробувань, які проводяться на мікроорганізмах, присутніх у зразку, з метою їх ідентифікації; Ці мікроорганізми зазвичай є бактеріями. Для мікробіолога є велика кількість біохімічних тестів.
Однак вибір цих тестів ґрунтується на попередніх висновках, таких як картина забарвлення Gram і символи росту, які дозволяють бактеріям бути віднесені до певної категорії. Біохімічні тести базуються головним чином на метаболічних властивостях кожного типу бактерій.
Не всі бактерії володіють однаковими властивостями, тому досліджується, чи вони мають певний фермент, додаючи субстрат і чекаючи реакції. Зазвичай це визначення дається зміною кольору або рН в культуральному середовищі.
Менш ніж 15 біохімічних тестів часто потрібні для надійної ідентифікації бактерії до видового рівня. Виконання більшої кількості біохімічних тестів може підвищити впевненість у ідентифікації.
Більшість цих біохімічних тестів проводяться в сироватці або плазмі крові. Проте, вони також можуть бути виконані в інших біологічних виділеннях, таких як сеча, спинномозкова рідина, плевральна рідина і стілець, серед інших..
Індекс
- 1 Класифікація
- 1.1 Універсальний
- 1.2 Диференціали
- 1.3 Специфічні
- 2 Види біохімічних тестів
- 2.1 Тест каталази
- 2.2 Оксидазний тест
- 2.3 Випробування солоного аніту манітолу (MSA)
- 2.4 Коагулазний тест
- 2.5 Тест на уреазу
- 3 Якими є біохімічні тести??
- 4 Важливість
- 5 Посилання
Класифікація
Біохімічні тести можна розділити на 3 групи:
Універсальний
Це тести, які можуть бути виконані на будь-якому зразку і які спрямовують мікробіолога на наступні біохімічні тести, які повинні бути виконані для того, щоб отримати надійну ідентифікацію..
Приклад
Тест каталази та оксидази.
Диференціали
Це тести, які проводяться для виявлення мікроорганізмів, присутніх у зразку, до видового рівня.
Ідентифікація проводиться на основі результатів комбінації тестів, оскільки окремі результати не є достатньо інформативними для ідентифікації.
Приклад
Випробування IMViC та випробування на використання цукру.
Конкретні
Вони є специфічними тестами для певного набору видів або для підтипу виду. Ці тести, як правило, робляться для підтвердження або ідентифікації на рівні підвиду. Індивідуальні тести самі по собі є інформативними.
Приклад
Тест γ-глутаміл-амінопептидази.
Види біохімічних тестів
Тест каталази
Тест каталази є тестом для демонстрації присутності ферменту каталази шляхом розкладання пероксиду водню на кисень і воду. Невелика кількість бактерій додається до краплі перекису водню (3%) на слайді.
Тест каталази є простим тестом, який використовують мікробіологи для визначення видів бактерій і визначення здатності деяких мікробів розщеплювати пероксид водню, виробляючи фермент каталази.
Якщо спостерігаються бульбашки кисню, це означає, що бактерія володіє ферментом каталази, оскільки вона каталізує розкладання пероксиду водню на кисень і воду. Сказано, що організм є позитивним каталази (наприклад: Staphylococcus aureus).
Тест оксидази
Цей тест використовується для ідентифікації мікроорганізмів, що містять фермент цитохромоксидази (важливий у транспортному ланцюжку електронів). Він зазвичай використовується для розрізнення родин Enterobacteriaceae і Pseudomadaceae.
Цитохромоксидаза переносить електрони з електронно-транспортної ланцюга в кисень (кінцевий акцептор електронів) і зменшує її до води. Тести оксидази забезпечують штучні донорні і акцепторні молекули електронів.
Коли донор електронів окислюється дією цитохромоксидази, середовище стає темно-фіолетовим і вважається позитивним результатом. Мікроорганізм Pseudomonas aeruginosa є прикладом позитивної оксидазної бактерії.
Тест на агари з солоним манітом (MSA)
Цей тип тесту є як вибірковим, так і диференційним. MSA відбере організми, здатні жити в середовищі з високою концентрацією солі, такі як види Стафілокок на відміну від виду Стрептокок, зростання яких у цих умовах гальмується.
Диференціальним компонентом у цьому тесті є цукор-маніт. Організми, здатні використовувати манітол як джерело їжі, будуть виробляти побічні продукти ферментації, які є кислими і, отже, знижуватимуть рН середовища.
Кислотність середовища викликає жовтий колір індикатора рН, фенолового червоного. Прикладами видів бактерій, які можна диференціювати за цим способом, є: Staphylococcus aureus (позитивний, оскільки він ферментує маніт) і Staphylococcus epidermidis (негативний, оскільки манітол не ферментує).
Коагулазний тест
Коагулаза - це фермент, який допомагає коагулювати плазму крові. Цей тест проводиться на позитивних грампозитивних і каталаз-позитивних бактеріях для ідентифікації Staphylococcus aureus (позитивна коагулаза) Справді, коагулаза є фактором вірулентності цього виду бактерій.
Утворення згустків навколо інфекції, викликаної цією бактерією, ймовірно, захищає її від фагоцитозу. Цей тест дуже корисний, коли ви хочете розрізняти Staphylococcus aureus інших видів Стафілокок які є негативними коагулазами.
Уреазний тест
Цей тест використовується для виявлення бактерій, здатних гідролізувати сечовину, використовуючи фермент уреазу. Він зазвичай використовується для розрізнення статі Proteus інших кишкових бактерій.
Гідроліз сечовини виробляє аміак як один з його продуктів. Ця слабка база підвищує рН середовища вище 8,4, а показник рН (феноловий червоний) змінюється від жовтого до рожевого. Прикладом позитивної уреазной бактерії є Proteus mirabilis.
Для чого проводяться біохімічні тести??
Біохімічні тести в мікробіології використовуються для діагностики захворювань, що викликаються мікробами, і для моніторингу лікування, що застосовується для боротьби з ними. Крім того, вони використовуються для скринінгу інфекційних захворювань і для їх прогнозування..
Біохімічна ідентифікація мікроорганізмів дає уявлення про те, що ці мікроорганізми здатні зробити, можливо, дискримінація різних штамів одного виду за специфічними біохімічними профілями.
Відмінності в специфічній ферментативній діяльності свідчать про екологію, фізіологію або природне середовище існування мікроорганізму, що в деяких випадках може вважатися важливою інформацією.
Значення
Структурні відмінності щодо форми, розміру і розташування бактерій дуже мало допомагають у процесі ідентифікації, оскільки існує багато видів бактерій, які мають подібну форму, розмір і диспозицію.
З цієї причини, в кінцевому рахунку, ідентифікація бактерій грунтується насамперед на відмінностях в їх біохімічній діяльності.
Кожен вид бактерій має чітко визначений набір метаболічних заходів, відмінних від усіх інших видів. Ці біохімічні "відбитки пальців" є властивостями, що контролюються бактеріальними ферментами.
Таким чином, біохімічні тести є важливими, оскільки вони допомагають досліднику правильно ідентифікувати патогени, присутні в зразку, і, таким чином, мати змогу рекомендувати пацієнту відповідне лікування..
Список літератури
- Беккет, Г., Уокер, С. і Рае, П. (2010). Клінічна біохімія (8-е изд.). Wiley-Blackwell.
- Clarke, P.H., & Cowan, S.T. (1952). Біохімічні методи бактеріології. Журнал загальної мікробіології, 6(1952), 187-197.
- Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Клінічна біохімія (5-е изд.). Elsevier Health Sciences.
- Goldman, E. & Green, L. (2008). Практичний довідник з мікробіології (2-е изд.). CRC Press.
- Harrigan, W. (1998). Лабораторні методи в харчовій мікробіології (3-е изд.). Academic Press.
- Васантакумарі, Р. (2009). Практична мікробіологія. Публікації BI Pvt Ltd.