Основа Cetrimida agar, препарат, застосування



The цетримидний агар або цетримид є селективним твердим культуральним середовищем, призначеним для виділення Pseudomonas aeruginosa. Вона базується на висвітленні виробництва пігментів, характерних для цього виду, і була розроблена з модифікації Tech agar, створеного King, Ward and Raney.

Вихідна формула містила солі хлориду магнію, сульфат калію, зброджування желатину підшлункової залози і агар-агар. Модифікація формули полягала в додаванні цетримиду (цетил триметил амонію броміду) і гліцерину.

Цетримидний агар корисний для мікробіологічного дослідження зразків, де присутній Pseudomonas aeruginosa. Слід зазначити, що ця бактерія має велике значення, тому що, хоча вона є частиною нормальної мікробіоти навколишнього середовища, вона часто веде себе як опортуністичний патоген..

Таким чином, однією з найпоширеніших проблем, спричинених цим мікроорганізмом, є внутрішньолікарняні інфекції, тобто ті, які відбуваються в умовах лікарні, що нападають на пацієнтів з депресивною імунною системою..

З іншого боку, через спорідненість, яку цей мікроорганізм має з вологістю, найбільш уразливими об'єктами забруднення є: допоміжне дихальне обладнання, медикаменти, небулайзери, джерела води, кондиціонери, дезінфектанти, мильні розчини, ін'єкційні розчини, відкриті рани катетерів, сечових катетерів, серед інших.

У цьому сенсі цетримидний агар корисний для виконання мікробіологічних контролів і посівів до раніше названих елементів.

Індекс

  • 1 Фонд
    • 1.1 Інтерпретація
  • 2 Підготовка
  • 3 Використання
  • 4 Розсіяне
  • 5 Обмеження
  • 6 Контроль якості
  • 7 Посилання

Фонд

Цетримидний агар заснований на здатності середовища сприяти росту P. aeruginosa, стимулюють вироблення їх пігментів і в свою чергу гальмують ріст інших мікроорганізмів.

Ці властивості обумовлені функцією, яку виконує кожна з її компонентів. Присутність желатинового пептона служить джерелом азоту, вітамінів і мінералів. Гліцерин або гліцерин діє як джерело вуглецю.

Зі свого боку, цетримід (цетилтриметиламмоний бромід) є речовиною, яка пригнічує ріст інших бактерій, ніж P. aeruginosa, включаючи інші види, що належать до одного роду.

Інгібування відбувається тому, що цетрамід діє як катіонний детергент, дестабілізує плазматичну мембрану більшості бактерій, за винятком P. aeruginosa і деякі інші, які вдалося вижити.

З іншого боку, він містить хлорид магнію і сульфат калію. Ці сполуки стимулюють фенотипову експресію, пов'язану зі здатністю Pseudomonas aeruginosa отримання різних пігментів, серед яких: піоціанін, піовердін, піорубін, піомеланін і флуоресцеин. Нарешті, він містить агар-агар, який надає їй тверду консистенцію.

Інтерпретація

Інтерпретація росту, отриманого в цьому агарі, здійснюється наступним чином:

Спостереження за круглими, гладкими колоніями з правильними краями, що виробляють синьо-зелені, зелені, коричневі або червонуваті пігменти, плюс викид фруктового запаху (аміноацетофенон), є можливим результатом присутності цієї бактерії в зазначеному зразку..

З іншого боку, це свідчить про P. aeruginosa спостереження яскраво-жовто-зеленого пігменту на колоніях, коли пластина піддається впливу ультрафіолетового світла.

Слід зазначити, що кожен спостережуваний колір обумовлений продукцією конкретного пігменту. Синьо-зелений пігмент відповідає продукуванню піоціаніну, зеленого до піовердина, червонуватого до пірурбіну, коричневого до піомеланіну і яскраво-жовтувато-зеленої флуоресценції під ультрафіолетовим світлом до флуоресцеїну.

Підготовка

Зважують 43 г зневодненого середовища і розчиняють у дистильованій воді. Додають 10 мл гліцерину. Віднесіть суміш до джерела тепла. Дайте кип'ятити кілька хвилин до повного розчинення.

Автоклавують при 121 ° С протягом 15 хвилин. Дозвольте стояти і служити в стерильних чашках Петрі, коли температура становить близько 50 ° C.

Дозвольте застигнути, інвертувати, замовити в плакери і зберігати в холодильнику до використання. Для посадки плівок ацетату cetrimide їх треба заздалегідь видалити з холодильника і дати їй температуру в приміщенні..

Кінцевий рН середовища повинен бути 7,2 ± 0,2.

Колір зневодненого середовища - бежевий, а препарат - непрозорий.

Використання

Цетримидний агар може бути використаний для посадки всіх видів зразків, в яких присутній Pseudomonas aeruginosa. Тому він корисний у всіх галузях мікробіології (екологічні, промислові, клінічні, водні та харчові)..

Дуже важливо проаналізувати лікарняне середовище і, таким чином, мати змогу застосовувати коригувальні медіації, оскільки цей мікроорганізм досягає пацієнтів через обладнання, ліки, розчини та забруднені матеріали, які використовуються пацієнтом..

Таким чином, мікроорганізм може інфікувати нижні дихальні шляхи, сечові шляхи і рани імунодепресивних пацієнтів.

Підрахунок колоній також може бути зроблений P. aeruginosa в мікробних граничних тестах.

Посів

Цетримидний агар може бути використаний в якості первинної культури. Пластину інокулюють в один з її країв і звідти розподіляють шляхом вичерпання до решти пластини. Рідкі зразки можна висівати на поверхню за допомогою дригальского шпателя.

Пластини інкубують в аеробіозі при 37 ° С протягом 24 годин інкубації.

Обмеження

-Невеликий відсоток штамів  Pseudomonas aeruginosa не виробляють піоціанін, тому можна інтерпретувати помилковий негатив.

-Деякі види псевдомонад клінічного значення гальмуються в цьому середовищі.

-Незважаючи на дотримання описаних характеристик Pseudomonas aeruginosa, вони повинні бути підтверджені додатковими тестами ідентифікації. Тест, який не повинен бути відсутній, є тестом на оксидазу, він повинен бути позитивним.

-Деякі ентеробактерії можуть рости в цьому середовищі і розвивати жовтий пігмент, але він відрізняється від Pseudomonas aeruginosa в якій при підданні пластини ультрафіолетовому світлу відсутня флуоресценція.

-Serratia marcescens вдається розвивати і виробляти рожевий пігмент.

-Якщо бляшки, засіяні цетримидним агаром, піддаються протягом часу при кімнатній температурі, штами P. aeruginosa вони можуть втрачати флуоресценцію, що спостерігається при ультрафіолетовому світлі, однак властивість відновлюється, якщо вона повторно інкубується при 37 ° С.

Контроль якості

Для перевірки належного функціонування цетримидного агару можна використовувати контрольні штами, такі як: Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027, Stenotrophomonas maltophilia ATCC 13637, Escherichia coli ATCC 25922 і Staphylococcus aureus ATCC 25923.

Очікувані результати:

  • До P. aeruginosa хороший ріст, з синьо-зеленуватим пігментом і позитивним флюоресцеїном.
  • S. maltophilia і S. aureus буде частково або повністю гальмуватися.
  • Очікується, що Escherichia coli бути повністю гальмується.

Список літератури

  1. Callicó A, Cedré B, Sifontes S, Torres V, Pino Y, Callіs A, Esnard S. Фенотипова та серологічна характеристика клінічних ізолятів Pseudomonas aeruginosa. VacciMonitor. 2004; 13 (3): 1-9.
  2. Лабораторії Конда Пронадіса. Основа цетримидного агару. 2014. Доступно за адресою: condalab.com
  3. Лабораторії Британії. Cetrimida агар. 2015. Доступно за адресою: britanialab.com
  4. BD Laboratories BD Pseudosel agar (цетримидний агар). 2013. Доступний на сайті: bd.com
  5. Лабораторія Франсіско Сорія Мельгізо, C.А. Цетримидний агар. 2009. Доступний за адресою: http://f-soria.es