Фундамент, підготовка та використання MacConkey Agar

The Агар MacConkey Це тверда культуральна середовище, що дозволяє ексклюзивно ізолювати грамнегативні бацили. З цієї причини він є селективним середовищем, а також дозволяє розрізняти бродильні і неферментирующие бацили лактози, що робить її диференційною середовищем. Це одна з найбільш широко використовуваних культуральних середовищ у лабораторії мікробіології.

Це середовище використовується в основному для виділення грамнегативних бацил, що належать до сімейства Enterobacteriaceae, включаючи опортуністичні та ентеропатогенні види.

Він також може бути використаний для ізоляції інших кишкових бацил, які населяють шлунково-кишковий тракт, але не належать до них Enterobacteriaceae, як Aeromonas sp, Plesiomonas sp, серед інших.

Нарешті, він може ізолювати інші грамнегативні, не ферментуючі бацили глюкози, які знаходяться в навколишньому середовищі, воді або грунтах, але іноді можуть бути опортуністичними патогенами, такими як Pseudomonas sp, Acinetobacter sp, Лужний sp, Chromobacterium violaceum, Stenotrophomonas maltophilia, серед інших.

Індекс

• 1 Фонд
  • 1.1 Агар MacConkey
• 2 Підготовка
• 3 Використання звичайного агару MacConkey
• 4 Інші варіанти агару MacConkey
  • 4.1 Макарський агар з сорбітом
  • Агар MacConkey без кристалічної фіалки або солі
  • 4.3 Агар MacConkey з цефоперазоном
  • 4.4 Агар маккокі, приготований з 10% морської води v / v
• 5 Посилання

Фонд

Агар MacConkey

Основу цього середовища можна пояснити описом його складових, оскільки кожна з них має мету, що визначає його властивість.

Жовчні солі і фіолетовий кристал

У цьому сенсі агар MacConkey має складний склад. Перш за все він містить солі жовчних кислот і фіолетовий кристал.

Ці елементи відповідають за гальмування росту грампозитивних бактерій і деяких вимогливих до нього грамнегативних паличок. У свою чергу це сприяє розвитку грамнегативних бацил, які не піддаються впливу цих речовин. Саме тому він є селективним середовищем.

Кажуть, що він трохи вибірковий в порівнянні з іншими середовищами, які також пригнічують ріст грампозитивних бактерій, а також більшості грамнегативних бактерій..

Вона надзвичайно селективна для конкретного роду, такого як агар TCBS для виділення Vibrio cholerae та інших подібних галофільних і алкалофільних видів.

Пептони, поліпектони і лактоза

Містить речовини, що забезпечують необхідні поживні речовини для мікроорганізмів, що розвиваються в цьому середовищі, такі як пептони, поліпектони та лактоза.

Лактоза є ключовим моментом для того, щоб середовище було диференційним середовищем, оскільки мікроорганізми, які здатні ферментувати лактозу, розвинуть сильні рожеві колонії.

Деякі бактерії можуть ферментувати лактозу повільно або слабо, розвиваючи блідо-рожеві колонії і зберігаючи позитивну лактозу.

Ті, які не ферментують лактозу, використовують пептони як джерело енергії, що продукує аміак, подщелачивая середовище. Тому колонії, які походять, є безбарвними або прозорими.

Індикатор PH

Зміна кольору досягається за допомогою іншого важливого з'єднання, що має агар MacConkey. Це з'єднання є індикатором рН, який в даному випадку є нейтральним червоним.

Ферментація лактози генерує продукцію змішаних кислот. Вони підкисляють середовище при рН нижче 6,8..

Це призводить до того, що індикатор рН повернеться до інтенсивного рожевого відтінку. Інтенсивність забарвлення може змінюватися в залежності від кінцевого pH.

Дистильована вода, хлорид натрію і агар

З іншого боку, воно містить дистильовану воду і хлорид натрію, які дають середовище гідратації і осмотичної рівноваги. Нарешті, середовище містить агар, який є підставою, що забезпечує консистенцію твердої середовища.

Приготовану агаризовану середу MacConkey повинна мати кінцевий рН, встановлений на рівні 7,1 ± 0,2..

Підготовка

Для одного літра агару MacConkey, 50 г зневодненого середовища необхідно зважити, потім помістити в фіолу і розчиняти в одному літрі дистильованої води. Через 10 хвилин спокою її нагрівають, постійно перемішуючи до кипіння протягом 1 хвилини.

Потім поміщають фіолу в автоклав і стерилізують при 121 ° С протягом 20 хвилин. Наприкінці часу її видаляють з автоклава і дають охолонути до температури 45 ° C, потім подають у стерильні чашки Петрі всередині ламінарного потоку або перед пальником Bunsen..

Дайте застигнути і зберігайте в пластинчастий утримувач, інвертований і охолоджуйте при 2-8 ° C до використання.

Для отримання агару MacConkey, який інгібує ефект обростання, що виробляється родом Proteus, використовують агар MacConkey з низьким вмістом солі..

Використання звичайного агару MacConkey

Агар MacConkey включений у всі набори культуральних середовищ, призначених для посіву клінічних зразків, отриманих в лабораторії. Він також корисний у харчовій мікробіології та мікробіології навколишнього середовища.

Різноманітність грамнегативних бацил, які ростуть у цьому середовищі, виражають фенотипічні характеристики, які допомагають припустимо діагностиці даного виду. Наприклад, розмір, колір, консистенція і запах колоній є деякими характеристиками, які можуть керуватися.

У цьому середовищі видів Росії Escherichia coli, Klebsiella sp і Enterobacter sp виробляють сильні рожеві колонії, оточені ділянкою обложеної жовчі.

У стільки ж бактерій як Citrobacter sp, Providencia sp, Serratia sp та Hafnia sp вони можуть з'являтися без кольору після 24 годин або блідо-рожевого кольору через 24-48 годин.

Аналогічно, роди Proteus, Edwadsiella, Salmonella і Shigella виробляють безбарвні або прозорі колонії.

Інші варіанти агару MacConkey

Існують інші варіанти агару MacConkey, які мають специфічні цілі. Далі вони згадуються:

Агар MacConkey з сорбітом

Це середовище розроблено для розрізнення ентеропатогенного штаму (Escherichia coli ентерогеморагічний O157: H7) решти штамів Escherichia coli.

Це середовище змінює вуглеводну лактозу на сорбіт. Штами штам E. coli ентерогеморагічна O157: H7 відрізняється від інших, оскільки вони не ферментують сорбіт і тому отримують прозорі колонії, однак решта штамів E. coli якщо вони ферментують сорбіт і колонії сильно рожеві.

Агар MacConkey без кристалічної фіалки або солі

Цей агар значно відрізняється від класичного агару MacConkey, оскільки він не має кристалічного фіолетового, грампозитивні бактерії можуть рости.

З іншого боку, відсутність солі пригнічує появу роїння на агарі, продукованому деякими кишковими бацилами, такими як ті з роду Proteus, і таким чином полегшують виділення всіх присутніх бактерій, включаючи грампозитивні бактерії.

Агар MacConkey з цефоперазоном

Цей варіант агару MacConkey був розроблений, щоб спочатку ізолювати Laribacter hongkongensis пізніше вони зрозуміли, що це корисно для ізоляції Росії Arcobacter butzleri. AОбидва злегка зігнуті негативні бацили граму, стійкі до цефоперазону.

Ці бактерії нещодавно були пов'язані як причини гастроентериту та діареї, придбаних у азіатських та європейських індивідуумів..

Антибіотик дозволяє пригнічувати супутню флору шлунково-кишкового тракту, що сприяє розвитку цих бактерій, запобігаючи їх непоміченості, оскільки для їх вирощування потрібно 72 години.

Агар MacConkey приготований з 10% морської води v / v

Цей варіант корисний для оцінки бактеріальних показників здоров'я фекального забруднення, у тому числі тотальних коліформ і фекальних коліформ в рекреаційних солоних водах (пляжі і затоки)..

Cortez et al. 2013 показали, що підготовлена ​​таким чином середовище значно збільшує відновлення цих мікроорганізмів у сольовому середовищі, порівняно з використанням агару MacConkey, приготованого з дистильованою водою..

Це пояснюється тим, що модифікована середовище стимулює ріст бактерій, які фізіологічно перебувають у стані спокою, "життєздатні, але не культивовані", тому вони не відновлюються в звичайних середовищах.

Список літератури

1. Lau SK, Woo PC, Hui WT, et al. Використання цефоперазона агару MacConkey для селективної ізоляції Laribacter hongkongensis. J Clin Microbiol. 2003; 41 (10): 4839-41.
2. "Агар МакКонкі". Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 4 квітня 2018, 18:16 UTC. 29 грудня 2018, 15:22 uk.wikipedia.org
3. Forbes B, Sahm D, Вайсфельд А. (2009). Мікробіологічна діагностика Bailey & Scott. 12 ed. Аргентина Panamericana S.A Редакція.
4. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Мікробіологічна діагностика. (5-е изд.). Аргентина, редакція Panamericana S.A..
5. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Вальбуена О. Вплив культуральних середовищ, приготованих з морською водою на показники здоров'я в морських водах курортів Чичірівіче, штат Фалькон, Венесуела. Rev Soc Come Microbiol 2013 рік; 33: 122-128
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Практична клінічна мікробіологія. Університет Кадісу, 2-е видання. Служба публікацій UCA.