Живильний агаровий фундамент, підготовка і використання

The поживний агар це неселективне і недиференційоване тверде середовище для культивування. У цьому середовищі ростуть всі види бактерій, не вимагають з погляду харчування.

Це простий засіб і, незважаючи на свою назву, містить більш низьку поживну цінність порівняно з іншими подібними середовищами, такими як агар з інфузії мозку серця або соєвий агар триптикази..

Його корисність у лабораторії дуже різноманітна. В основному використовується для субкультури видів, зміст штамів, підрахунок колоній, як основа для підготовки кров'яного агару.

Так само, завдяки своєму світло-бежевому кольору, виробництво пігментів генерується деякими бактеріальними штамами, такими як зеленуватий пігмент Pseudomonas aeruginosa, цегляний червоний пігмент виробляється Serratia marcescens при кімнатній температурі золотисто-жовтий пігмент Staphylococcus aureus, серед інших.

Крім того, він є одним з найбільш економічно зростаючих засобів масової інформації на ринку.

Індекс

• 1 Фонд
• 2 Склад
• 3 Підготовка
• 4 Використання
  • 4.1 В якості основи для підготовки кров'яного агару
  • 4.2 Стимулюють спорулювання спороутворюючих бактерій
  • 4.3 Технічне обслуговування
  • 4.4 Підрахунок колоній
  • 4.5 Виконання діагностичних тестів
  • 4.6 Відновлення мезофільних аеробних рекреаційних солоних вод (Пляжі)
• 5 Посилання

Фонд

Як вже згадувалося, це дуже просте засіб, засноване на забезпеченні поживних речовин для бактеріального росту без обмежень і без складних реакцій на інтерпретацію.

Оскільки середовище напівпрозора, вона ідеально підходить для підрахунку колоній методом посіву по глибині.

Композиція

В основному складається з екстракту м'яса або екстракту дріжджів, пептонів або перетравлення панкреатичного желатину, агар-агару, хлориду натрію і дистильованої води.

Екстракт м'яса або дріжджів і пептонів являє собою джерела вуглецю і основних мінералів (азот, фосфор і сірка), які будуть використовуватися бактеріями як джерелом енергії і факторами росту..

Аналогічним чином, агар-агар є основою всіх твердих рослинних середовищ, замінюючи желатин, який був першим базовим з'єднанням, використовуваним Робертом Кохом для додання його твердому консистенції в середовищі..

Агар являє собою полісахарид, що складається з галактози, галактоманнану, агарози і агаропектина. Вона встановлюється при температурі 40 ° C і плавиться близько 100 ° C.

Зі свого боку, хлорид натрію забезпечує середовище з осмолярністю, необхідною для розвитку бактерій.

Нарешті, вода служить для гідратації і розчинення ліофілізованих сполук. Необхідно використовувати дистильовану воду, доведену до нейтрального pH. Водопровідна вода не повинна використовуватися, оскільки вона містить кальцій і магній, які можуть реагувати з фосфатами в середовищі і утворювати нерозчинні солі.

Підготовка

Для одного літра поживного агару необхідно зважити 31 г зневодненого середовища. Його поміщають у фіолу і розчиняють у літрі дистильованої води. Після 5 хвилин спокою нагрійте над джерелом тепла і постійно перемішуйте, поки вона не закипить протягом 1 або 2 хвилин.

Потім помістіть фіолу в автоклав і стерилізуйте при 121 ° С протягом 20 хвилин.

Наприкінці часу її видаляють з автоклава і подають у стерильні чашки Петрі, використовуючи ламінарний потік або пальник Бунзена..

Якщо чашки Петрі є одноразовими (пластиковими), середовище слід розподілити, коли агар має температуру приблизно 50 ° C, щоб запобігти їх деформуванню через надмірне нагрівання..

Дайте застигнути і зберігайте в пластинчастий утримувач, інвертований і охолоджуйте при 2-8 ° C до використання.

Плити повинні бути загартовані перед посівом. Живильні агарові пластини не повинні використовуватися, якщо вони забруднені або зневоднені.

PH підготовленого середовища необхідно відрегулювати до 7,3 ± 0,2.

Використання

Це найпростіша культуральна середовище, що використовується в лабораторії мікробіології. Його формула відмінно підходить для росту невибагливих бактерій.

Нижче пояснюються його основні використання:

В якості основи для приготування кров'яного агару

Це середовище іноді використовується як основа для приготування кров'яного агару, однак це не найчастіше використовується основа.

Стимулюють спорулювання спороутворюючих бактерій

Ця культуральна середовище особливо корисна для стимулювання споруляції спороутворюючих бактерій, таких як Bacillus sp.

Для цього висівають штам роду Bacillus і інкубували протягом 24 годин при 37 ° С в аеробіозі. Як тільки колонії вирощуються, пластина піддається впливу напруги, тобто температура печі збільшується до 44 ° C і залишається на 24 години більше або вводиться в холодильник протягом 24 годин..

Наприкінці культури культури розширюють і фарбують за допомогою плями Грам або плями Шеффера-Фултона. У них будуть спостерігатися бацили з ендоспорами (спори всередині палички) і екзоспори (спори поза бацили)..

Технічне обслуговування

Деякі дослідницькі лабораторії або університетські лабораторії підтримки викладання повинні підтримувати життєздатні клінічно важливі бактерії настільки довго, наскільки це можливо, щоб використовувати бактеріальний банк (бактеріотека) для дослідницької роботи або для підготовки навчальної практики. Студенти навчаться маніпулювати та ідентифікувати ці мікроорганізми.

Для цієї мети може бути використаний поживний агар, а також агар для інфузії серцевого мозку. Агар готують, розливають в бакелітові трубки і нахиляють на підставі, таким чином, що агар застигає, утворюючи блок на дні і скос на поверхні (піка флейти)..

Кожну пробірку позначають назвою бактерій, що підлягають посадці, і датою. На ободок кожну з бактерій висаджують і інкубують протягом 24 годин, після вирощування колоній трубки зберігають при кімнатній температурі..

Бактеріотеку потрібно відновлювати від 1 до 3 місяців, щоб уникнути забруднення та зневоднення середовища, а також загибелі бактерій..

Таким чином можна підтримувати лише невибагливі бактерії.

Підрахунок колоній

Хоча існують спеціалізовані засоби для підрахунку колоній, такі як стандартний кол-во агару, для цієї мети може бути використаний поживний агар або за допомогою посіву на поверхні за допомогою шпателя drigalski або по глибині. Тому він дуже корисний при мікробіологічному аналізі харчових продуктів і води.

Виконання діагностичних тестів

Оскільки це середовище, що не містить крові, або будь-яку іншу добавку, ідеально вважати, що колонії, вирощені в цьому середовищі, виконують тест каталази.

Аналогічно, завдяки його чіткому кольору, зазначено проводити оксидазние випробування безпосередньо на ділянці засіяного агару, без перешкод.

Відновлення мезофільних аеробних рекреаційних солоних вод (Пляжі)

Живильний агар, приготований з 10% морської води, корисний для оцінки мезофільних аеробів у морських водах.

Таким чином, ми можемо оцінити рівень реального забруднення, яке води мають ці мікроорганізми, оскільки в цьому типі зразків результати перекриваються при використанні культуральних середовищ, приготовлених звичайним способом..

Це було продемонстровано Cortez et al. в 2013 році в дослідницькій роботі.

Це пояснюється різкою зміною, яку зазнають бактерії під час переходу від гіпер-сольового середовища до середовища з низьким солеюванням, тому мікроорганізми входять у стан млявості, в якому вони життєздатні, але не обробляються.

Список літератури

1. "Живильний агар". Вікіпедія, Вільна енциклопедія. 13 вер. 2016, 20:33 UTC. 29 грудня 2018, 21:04 en.wikipedia.org
2. Forbes B, Sahm D, Вайсфельд А. (2009). Мікробіологічна діагностика Bailey & Scott. 12 ed. Аргентина Panamericana S.A Редакція.
3. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Мікробіологічна діагностика. (5-е изд.). Аргентина, редакція Panamericana S.A..
4. Cortez J, Ruiz Y, Medina L, Вальбуена О. Вплив культуральних середовищ, приготованих з морською водою на показники здоров'я в морських водах курортів Чичірівіче, штат Фалькон, Венесуела. Rev Soc Come Microbiol 2013 рік; 33: 122-128
5. Paredes V, Dias V, Silva de Almeida M та Cardoso M. Мікробіологічна якість води для інсемінаційних доз, для Suinos.Cient.Agro.Amaz. 2013 рік; 1 (2): 42-49.
6. García P, Paredes F, Fernández del Barrio M. (1994). Практична клінічна мікробіологія. Університет Кадісу, 2-е видання. Служба публікацій UCA.