Основа, підготовка та використання агару Salmonella-Shigella

The Агар Salmonella-Shigella також відомий як SS агар, являє собою помірно селективну і диференційну середу, спеціально призначену для виділення ентеропатогенних бактерій родів Salmonella і Shigella, як з екологічних, так і з клінічних зразків..

SS агар має складний склад; Вона складається з м'ясного екстракту, пептона, лактози, солей жовчних кислот, цитрату натрію, тіосульфату натрію, цитрату тривалентного заліза, агару, нейтрального червоного, яскраво-зеленого і дистильованої води. Враховуючи його велику селективність, можна висаджувати зразки з рясною змішаною флорою.

У мікробіологічних лабораторіях середовище Salmonella-Shigella широко використовується для дослідження наявності Salmonella і Shigella у зразках диспепсійних фекалій, стічних вод, питної води та харчових продуктів.

Іноді необхідно використовувати попередньо збагачені бульйони (лактозний бульйон) і збагачення (селеніт цистиновий бульйон) для відновлення штамів Salmonella.

Ці кроки потрібні, коли існує підозра на наявність сальмонел в дуже низькій кількості або де штам може бути погано сприйнятий процесами, типовими для промислового виробництва, головним чином оброблених харчових продуктів. Доцільно також збагачувати зразки стільця від пацієнтів, які отримували антибіотики.

Згодом збагачений бульйон можна посіяти на агар Salmonella-Shigella та інші подібні середовища, такі як ксилозний агар, дезоксисилоксан-лізин (XLD) і ентероагрегат Hektoen (HE)..

Індекс

• 1 Фонд
  • 1.1 Харчова потужність
  • 1.2 Послідовність
  • 1.3 Вибірковий
  • 1.4 Диференціальний
• 2 Підготовка
• 3 Використовуйте
• 4 Обмеження
• 5 Контроль якості
• 6 Посилання

Фонд

Кожен компонент культурального середовища Salmonella-Shigella має специфічну функцію, і суміш в цілому надає їй властивості, які характеризують його.

Поживна сила

Екстракт м'яса і пептон (переварена казеїн і тканини тварин) забезпечують необхідні поживні речовини (азоти, вуглець і вітаміни) для розвитку мікроорганізмів, здатних переносити решту компонентів.

Послідовність

Агар-агар відповідає за забезпечення твердої консистенції середовищі.

Вибірковий

Це середовище високоселективно, тому що містить солі жовчних кислот, цитрат натрію і яскраво-зелений колір. Таким чином, він гальмує зростання всіх грампозитивних бактерій і більшості грамнегативних паличок, включаючи деякі коліформні бактерії..

Хоча бактерії роду Salmonella і деякі штами Shigella підтримують ці сполуки.

Головним чином, рід Salmonella дуже стійкий до жовчних солей, так що вони здатні жити в жовчному міхурі деяких хворих носіїв, які постійно виганяють бактерії через кал..

Диференціальний

Лактоза є ферментируемим вуглеводом, який допомагає диференціювати штами, що ферментують лактозу, з неферментирующих штамів. Про цю властивість свідчить наявність індикатора рН, який у цьому середовищі є феноловим червоним.

Штами, що ферментують лактозу, дають червоні колонії, в той час як неферментирующие штами є безбарвними. Ця характеристика важлива, оскільки Salmonella і Shigella не ферментують лактозу.

З іншого боку, це середовище містить тіосульфат натрію в якості джерела сірки і цитрат тривалентного заліза в якості джерела заліза. Обидва сполуки здатні диференціювати бактерії, здатні продукувати сірководень. Вони реагують на утворення чорного осаду нерозчинного і видимого сульфіду тривалентного заліза.

Ця властивість має ряд штамів роду Salmonella. Як правило, їхні колонії безбарвні плоскі з чорною крапкою в центрі. Решту сальмонел не виробляють H₂S і розвиваються як безбарвні колонії.

З іншого боку, колонії роду Shigella безбарвні, без почерніння.

Підготовка

Це означає, що його дуже просто приготувати.

Зважують 63 г зневодненого комерційного середовища і розчиняють в одному літрі дистильованої води. Нагрівають розчин і перемішують. Суміш може досягати кипіння протягом декількох хвилин.

Це середовище не повинно автоклавуватися. Після його розчинення його подають безпосередньо на одноразові або подвійні стерильні пластини.

При затвердінні вони розташовуються в інвертованому вигляді в дощечках і зберігаються в холодильнику (2-8 ° C), поки вони не використовуються.

Середовище після приготування повинно бути pH 7,2 ± 0,2 і помаранчево-червоним.

Важливо, щоб пластини були загартовані перед посівом зразків. Можна безпосередньо висівати початковий зразок, вивантажуючи матеріал на частину агару, а потім звідти протікати виснаження.

У разі використання збагачених бульйонів, пропускають порцію селенітового бульйону і висівають дригальським шпателем.

Інкубуйте при 37 ° С протягом 24 годин при аеробіозі.

Майте на увазі, що кількість грам для зважування та кінцевий рН середовища може варіюватися від одного комерційного дому до іншого. Основна пластина середовища завжди приносить показання до його приготування.

Використовуйте

Він часто використовується в аналізі культур калу та в мікробіологічному дослідженні зразків залишкової води, питної води та продуктів харчування.

Часто готують подвійні пластини, з одного боку поміщають агар Salmonella-Shigella, а з іншого боку - агар..

Обмеження

-Деякі штами Shigella не ростуть у цьому середовищі. Тому він не рекомендується для первинної ізоляції цього роду.

-Не кожна ясна колонія з чорним центром свідчить про сальмонели; для правильної ідентифікації необхідно провести біохімічні тести, оскільки колонії деяких штамів Proteus не відрізняються від колоній Salmonella.

-Зневоднена середовище повинна бути обережною при впливі на навколишнє середовище, оскільки вона дуже гігроскопічна. Тому його необхідно зберігати в сухому і добре закритому середовищі. Відкривається дуже короткий час.

-З часом солі жовчних кислот у середовищі можуть осідати, утворюючи зображення, схоже з матовим в агарі, але це не впливає на результати.

-Деякі штами Shigella можуть повільно ферментувати лактозу.

Контроль якості

Щоб довести, що середовище працює належним чином, доцільно розводити відомі або сертифіковані контрольні штами та спостерігати, якщо зростання відповідає очікуваним характеристикам.

Для цього використовують штами Росії E. coli, Enterobacter sp, Klebsiella pneumoniae, Shigella flexneri, Salmonella typhimurium o Enterococcus faecalis.

Очікувані результати:

Escherichia coli --рожеві опуклі колонії.

Enterobacter і Klebsiella- великі колонії і червоні або рожеві слизові.

Shigella flexneri --прозорі або безбарвні плоскі колонії.

Salmonella typhimurium - безбарвні колонії з чорним центром.

Enterococcus faecalis-- загальне гальмування.

Список літератури

1. Difco Francisco Soria Melguizo Laboratories. Агар Salmonella-Shigella. 2009. Доступно за адресою: f-soria.es
2. BD Laboratory. Агар BD Salmonella-Shigella. 2013. Доступний на сайті: bd.com
3. Лабораторії Британії. Агар на Salmonella-Shigella. 2015. Доступно за адресою: britanialab.com
4. Діагностика Valtek. Агар Salmonella-Shigella (SS Agar) .2010. Доступно за адресою: andinamedica.com
5. Forbes B, Sahm D, Вайсфельд А. (2009). Мікробіологічна діагностика Bailey & Scott. 12 ed. Редакція Panamericana S.A. Аргентина.
6. Koneman E, Allen S, Janda W, Schreckenberger P, Winn W. (2004). Мікробіологічна діагностика. 5-е изд. Редакція Panamericana S.A. Аргентина.